純化基因組DNA、線粒體DNA、細菌、寄生蟲或病毒DNA
1.快速純化高品質,即用型DNA
2.重復性好,產量高
3.徹底去除污染物和抑制劑
QIAamp DNA Mini Kit使用硅膠膜技術從組織、拭子、CSF、血液、體液或尿液細胞中純化核酸。組織用酶裂解,離心柱分離過程無需機械勻漿操作,手動操作時間僅為20分鐘。QIAamp DNA Mini Kit可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動純化DNA。
詳細信息:
性能
QIAamp DNA Mini Kit可純化長達50 kb的DNA片段。這個長度的DNA可完全降解且有最高的擴增效率。獲得的核酸或DNA的量取決于樣本來源(見表)。
QIAamp樣本制備技術是完全經過驗證的,純化所得核酸可用于任何分子實驗或其他下游應用,而無侵犯專利的風險。
QIAamp DNA Mini Kit的產量
樣品 |
用量 |
總核酸的量(μg)* |
DNA 的量(μg)? |
血液 |
200 μl |
4–12 |
4–12 |
白膜層 |
200 μl |
25–50 |
25–50 |
細胞 |
106 |
20–30 |
15–20 |
肝臟 |
25 mg |
60–115 |
10–30 |
大腦 |
25 mg |
35–60 |
15–30 |
肺 |
25 mg |
25–45 |
5–10 |
心臟 |
25 mg |
15–40 |
5–10 |
腎臟 |
25 mg |
40–85 |
15–30 |
脾臟 |
10 mg |
25–45 |
5–30 |
* 核酸未經RNase處理 。
? 核酸經RNase處理??偤怂岬牧浚é蘥)*
原理
QIAamp DNA Mini Kit采用快速離心柱或真空操作,簡化了從人類組織樣本中純化DNA的過程。無需苯酚-氯仿抽提。DNA特異性結合到QIAamp硅膠膜上,污染物流走。PCR抑制劑,如:二價陽離子和蛋白,可通過兩步有效的洗滌被去除,結合在離心柱上的純DNA可用水或試劑盒中的緩沖液洗脫。QIAamp DNA技術從人組織樣本中純化得到的基因組、線粒體、細菌、寄生蟲或病毒DNA,可用于PCR和印跡實驗中。
操作流程
試劑盒含有優(yōu)化的緩沖液,能有效裂解樣本,可穩(wěn)定核酸,并促進DNA選擇性結合到QIAamp硅膠膜上。將乙醇加入到裂解物中,并上樣到QIAamp離心柱上。洗滌緩沖液用于去除雜質,高純的即用型DNA可用水或低鹽緩沖液洗脫。
組織用酶裂解,無需機械勻質化操作,方便的離心柱過程只需20分鐘的手工操作時間(裂解時間取決于樣品來源)。樣品可用離心處理,或已處理過的血液或其他體液可用QIAvac 24 Plus或QIAvac 6S真空底座處理。此外,嚴密的裂解過程使得QIAamp DNA Mini Kit非常適合于從細菌或寄生物中純化基因組DNA。在QIAcube全自動核酸純化儀上純化基因組DNA用以減少手動操作時間。
真空處理
可用真空裝置替代離心機處理血液或體液,可更快更方便地進行DNA純化。QIAamp Mini離心柱可在QIAvac 24 Plus真空底座上配合VacValves和VacConnectors使用。在樣本流速顯著不同時,需使用VacValves以確保一致的真空條件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。使用VacConnectors,也可使QIAamp離心柱操作在帶有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上進行。
應用
QIAamp DNA Mini Kit非常適合于從常規(guī)人組織樣本中純化DNA,包括:肌肉、肝臟、心臟、大腦、骨髓和其他組織、拭子(口腔、眼睛、鼻子、咽喉和其他)、CSF、血液、體液和尿液細胞。DNA可在20分鐘內從多達25 mg的組織或200 μl的液體中純化,洗脫體積50–200 μl。
技術參數(shù):
特點 |
參數(shù) |
Applications |
PCR, Southern blotting |
Elution volume |
50–200 μl |
Format |
Spin column |
Main sample type |
Whole blood, tissue, cells |
Processing |
Manual (centrifugation or vacuum) |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
Genomic DNA, mitochondrial DNA, bacterial DNA, parasite DNA, viral DNA |
Sample amount |
200 μl/25 mg/5 x 10e6 |
Technology |
Silica technology |
Time per run or per prep |
20 minutes |
Yield |
4–12 μg |
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