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黃熱病毒IgG抗體診斷試劑盒

發(fā)布時(shí)間:2014-4-14 11:35:45??????瀏覽次數(shù):5597

 [產(chǎn)品名稱]

通用名稱:黃熱病毒IgG抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱:Diagnostic Kit for Yellow fever virus IgG antibody(ELISA)

[包裝規(guī)格]

   96人份/盒

[用途]

黃熱病毒(YFV)IgG抗體診斷試劑盒適用于定性測定人血清或血漿中黃熱病毒IgG抗體,可作為黃熱病毒早期感染的臨床診斷指標(biāo)之一。

[檢驗(yàn)原理]

本試劑盒采用雙抗體夾心法,在預(yù)包被鼠源單抗-黃熱病毒特異性抗原復(fù)合物的反應(yīng)孔內(nèi)加入待測標(biāo)本,若標(biāo)本中有抗CHIV,則可在微孔板表面形成抗原-抗體復(fù)合物,再與酶標(biāo)二抗結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物,經(jīng)顯色系統(tǒng)顯色后,根據(jù)OD值判定有無YFV抗體的存在。

 [試劑盒組成]

1.    預(yù)包被反應(yīng)板                96孔×1塊

2.    酶結(jié)合物                    6ml×1瓶

3.    YFV陰性對(duì)照              0.5ml×1瓶

4.    YFV陽性對(duì)照              0.5ml×1瓶

5.    濃縮洗滌液                 30ml×1瓶

6.    樣品稀釋液                 30ml×1瓶

7.    顯色劑A、B液             各6ml×1瓶

8.    終止液(2M H2SO4)        5ml×1瓶

9.    說明書                     1份

[儲(chǔ)存條件及有效期]

試劑盒應(yīng)置2-8℃中避光保存,有效期12個(gè)月。

[適用儀器]

1.    微量移液器和潔凈的吸頭

2.    37℃恒溫箱或水浴鍋

3.    計(jì)時(shí)器

4.    洗板機(jī)

5.    振動(dòng)器

6.    酶標(biāo)儀 檢測波長450nm,參考波長630nm。

[樣本要求]

1.    樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備,按照正常的采血技術(shù)收集血液,全血標(biāo)本最好先放置37℃處理2小時(shí),3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘以上,使血清(漿)不含或極少含血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本,樣本離心后,再室溫放置2小時(shí)以上。

2.    樣品可以使用血清或者血漿,檸檬酸,肝素或EDTA等抗凝劑不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3.    樣品中含用疊氮鈉會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,高度溶血的樣品、沒有完全收縮的血清樣品或者有微生物污染的樣品可能會(huì)引起錯(cuò)誤結(jié)果。

4.    新鮮的樣品在2-8℃無菌條件可保存一個(gè)星期,新鮮樣品可長期貯存-20℃或以下,避免反復(fù)凍融。

[檢驗(yàn)方法]

1.    從冷藏環(huán)境中取出試劑盒,在室溫下平衡30分鐘,同樣將濃縮洗滌液做1:20稀釋。

2.    待測樣本用樣本稀釋液1:1000稀釋,每孔加入100μl,并設(shè)陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各2孔,分別加入陰、陽性對(duì)照100μl,再設(shè)空白對(duì)照1孔,置37℃溫浴60分鐘,棄去孔內(nèi)樣本,拍干。

3.    洗板:

1.    手工洗板:棄去反應(yīng)板條孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干;用洗滌液注滿每孔,勿溢出,靜置5-10秒,棄去孔內(nèi)洗滌液拍干,如此反復(fù)5次,拍干。

2.    洗板機(jī)洗板:選擇洗滌5次的程序洗板,洗液盈注滿每孔,并確保每次吸凈無殘留,最后在吸水紙上拍干。

1.    每孔加酶結(jié)合物100μl,空白對(duì)照孔不加,貼上膠紙,置37℃孵育30分鐘,同上洗板5次。

2.    每孔加顯色劑A液、B液各50μl,輕輕振蕩后,置37℃避光孵育15分鐘。

3.    每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),空白調(diào)零,在酶標(biāo)儀中讀取各孔OD值(450nm/630nm)。